Gélose Chapman
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La gélose Chapman est le milieu sélectif des bactéries halophiles et plus particulièrement fermentant le mannitol. C'est un milieu semi-synthétique.
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[modifier] Usage
Il est utilisé pour l'isolement des Staphylococcus.
Dans les pays anglo-saxons, une variante de ce milieu est appelée MSA (mannitol-salt-agar = gélose au mannitol et au sel).
[modifier] Composition
Composition pour la préparation d'un litre de milieu.
- Peptone :...................................10,0 g
- Extrait de viande de bœuf :..................1,0 g
- Chlorure de sodium :........................75,0 g
- Mannitol :..................................10,0 g
- Rouge de phénol :............................0,025 g
- Agar-Agar :.................................15,0 g
- Eau distillée :..................................qsp 1 Litre
-
- pH = 7,4
[modifier] Préparation
111 g par litre de milieu Autoclavage classique.
[modifier] Caractéristiques
- Une base nutritive ordinaire.
- Une teneur élevée en NaCl qui permet la sélection des bactéries halophiles (comme les Staphylococcus) et inhibe la grande majorité des autres bactéries.
- Un critère de différenciation : la fermentation du mannitol révélé grâce au virage de l'indicateur coloré de pH : le rouge de phénol qui permet une orientation vers certaines espèces (comme l'espèce Staphylococcus aureus).
[modifier] Lecture
On cultive sur ce milieu les Micrococcaceae et quelques autres (Bacillus, Enterococcus) et même très rarement des bacilles gram-négatif.
- Pas de virage ( le milieu reste rouge) : les colonies mannitol - car elle ne fermentent pas le mannitol, légère alcalinisation du milieu par l'utilisation de peptones dans leur métabolisme énergétique.
- virage au jaune du milieu : les colonies sont mannitol + car elles fermentent le mannitol dans leur métabolisme énergétique avec acidification du milieu.
remarquons que Chapman est une gelose selective des staphylococus.
Dans tout les cas, les microorganismes cultivant sur ce milieu ont mis en évidence leur caractère halophile.
